Kultury grzybów na szalce Petriego z agarem
Zastanawiałeś się kiedyś, jak hoduje się i przechowuje żywe kultury grzybów? Odpowiedzią jest szalka Petriego z agarem. Praca z agarem pozwala mykologom i hobbystom zachowywać, oczyszczać i namnażać ulubione szczepy. W tym poradniku przeprowadzimy cię od zarodników lub tkanki do zdrowej, czystej kultury. Pokażemy też, jak utrzymać ją w dobrej kondycji przez miesiące.
Czym jest szalka Petriego z agarem?
Agar to galaretowata substancja z wodorostów. Zmieszany ze składnikami odżywczymi, takimi jak ekstrakt słodowy i drożdże, tworzy twardą, odżywczą powierzchnię. Grzybnia, czyli wegetatywna część grzyba, dobrze na niej rośnie. Ponieważ widzisz każdy fragment wzrostu na szalce, łatwo dostrzegasz zakażenia. Dzięki temu możesz wybrać najsilniejszą, najczystszą grzybnię. Możesz sam wylewać szalki, ale potrzebujesz do tego szybkowaru i czystego stanowiska. Nasze gotowe szalki Petriego z agarem słodowo-drożdżowym są wylewane w sterylnych warunkach, więc możesz zacząć od razu.
Krok 1: zacznij od zarodników lub tkanki
Proces zaczyna się od zarodników lub małej próbki tkanki dojrzałego grzyba. Następnie ostrożnie przenosisz je na sterylną powierzchnię szalki Petriego z agarem.
- Zarodniki: najlepiej kiełkują na ubogiej szalce. Nasze szalki z agarem do zarodników mają lekki przepis słodowo-drożdżowy opracowany do kiełkowania.
- Tkanka (klonowanie): mały kawałek z wnętrza zdrowego grzyba daje dokładną kopię genetyczną tego grzyba. Więcej przeczytasz w naszym poradniku o poprawie genetyki grzybów przez klonowanie.
Krok 2: kiełkowanie i izolacja pierwotna
Gdy umieścisz zarodniki na agarze, kiełkują i zaczynają tworzyć grzybnię. Z czasem grzybnia rozrasta się po szalce jako delikatna sieć białych lub kolorowych strzępek. Ten etap nazywa się izolacją pierwotną. W tym czasie wybierasz fragmenty o najsilniejszym, najzdrowszym wzroście. W ten sposób możesz wyizolować unikalne szczepy lub odmiany. Po zaszczepieniu zamknij każdą szalkę Parafilmem: chroni przed zanieczyszczeniami, a jednocześnie pozwala na minimalną wymianę gazową potrzebną kulturze.
Krok 3: przeszczepianie, by kultura była czysta
Aby utrzymać żywą kulturę, regularnie przenoś mały kawałek grzybni na świeżą szalkę z agarem. Ten proces to przeszczepianie (subkultura), które utrzymuje kulturę żywotną i długowieczną. Zawsze pobieraj grzybnię z najczystszej, czołowej krawędzi wzrostu. Tak zostawiasz zakażenie za sobą i zachowujesz zdrowy, czysty szczep. Pracuj w nieruchomym powietrzu lub najlepiej przed komorą laminarną albo modułem HEPA i noś rękawiczki nitrylowe, by ograniczyć ryzyko zakażenia.
Krok 4: przechowywanie żywych kultur
Właściwe przechowywanie jest kluczowe dla trwałości żywych kultur. Większość hodowców trzyma szalki w lodówce w temperaturze około 4–8 °C. Chłód spowalnia grzybnię. W efekcie kultura wytrzymuje znacznie dłużej. Opisz też każdą szalkę szczepem i datą, aby śledzić swoją genetykę.
Szalka Petriego z agarem, a potem ziarno i płynna kultura
Gdy masz czystą kulturę na agarze, możesz przejść do kolejnego etapu: przenieś kawałek grzybni na sterylizowane ziarno albo namnóż go we wstępnie wysterylizowanej fiolce na płynną kulturę. Nie jesteś jeszcze gotowy na agar? Nasze gotowe strzykawki z płynną kulturą zawierają wyizolowaną genetykę, więc możesz od razu przejść do szczepienia.
Podsumowanie
Szalka Petriego z agarem to praktyczny sposób na zachowanie ulubionych szczepów. To także cenne narzędzie do eksperymentów. Z każdym przeniesieniem lepiej poznajesz swoje kultury. Krótko mówiąc, praca z agarem to podstawowa umiejętność każdego mykologa.
Nie masz jeszcze komory laminarnej? Dowiedz się, jak zbudować i używać still air box do czystej pracy z agarem.