Culturas de cogumelos em placa de Petri com agar

Já se perguntou como se cultivam e conservam culturas vivas de cogumelos numa placa de Petri com agar? O trabalho com agar permite a micólogos e amadores conservar, limpar e multiplicar as suas estirpes favoritas. Neste guia da placa de Petri com agar acompanhamo-lo dos esporos ou do tecido até uma cultura saudável e limpa. Mostramos também como mantê-la saudável durante meses.

O que é uma placa de Petri com agar?

O agar é uma substância gelatinosa obtida de algas. Misturado com nutrientes como extrato de malte e levedura, forma uma superfície firme e nutritiva. O micélio, a parte vegetativa do fungo, cresce bem nela. Como vê cada parte do crescimento na placa, deteta facilmente contaminações. Assim pode selecionar o micélio mais forte e limpo. Pode verter as suas próprias placas, mas precisa de uma panela de pressão e de um espaço limpo. As nossas placas de Petri com agar de malte e levedura prontas a usar são vertidas em condições estéreis, para começar de imediato.

Passo 1: comece com esporos ou tecido

O processo começa com esporos ou uma pequena amostra de tecido de um cogumelo maduro. Depois, transfere-os com cuidado para a superfície estéril de uma placa de Petri com agar.

• Esporos: germinam melhor numa placa pobre em nutrientes. As nossas placas de agar para esporos usam uma receita leve de malte e levedura pensada para a germinação.
• Tecido (clonagem): um pequeno pedaço do interior de um cogumelo saudável dá-lhe uma cópia genética exata desse cogumelo. Saiba mais no nosso guia para melhorar a genética de cogumelos através da clonagem.

Passo 2: germinação e isolamento primário

Quando coloca esporos no agar, estes germinam e começam a formar micélio. Com o tempo, o micélio espalha-se pela placa numa delicada rede de filamentos brancos ou coloridos. Esta fase chama-se isolamento primário. Durante ela, seleciona as zonas com o crescimento mais vigoroso e saudável. Assim pode isolar estirpes ou variedades únicas. Vede cada placa com Parafilm após a inoculação: mantém os contaminantes fora e permite as trocas gasosas mínimas de que a cultura precisa.

Passo 3: repicar para manter a cultura limpa

Para manter uma cultura viva, transfira regularmente um pequeno pedaço de micélio para uma placa de agar nova. Este processo chama-se repicagem e mantém a cultura vital e duradoura. Retire sempre o micélio do bordo de crescimento mais limpo e avançado. Assim deixa a contaminação para trás e mantém uma estirpe saudável e pura. Trabalhe com o ar parado ou, idealmente, em frente a uma câmara de fluxo ou unidade de filtragem HEPA, e use luvas de nitrilo para reduzir o risco de contaminação.

Passo 4: conservar culturas vivas

Uma boa conservação é crucial para a longevidade das culturas vivas. A maioria dos cultivadores guarda as placas no frigorífico a cerca de 4–8 °C. A temperatura baixa abranda o micélio. Como resultado, a cultura dura muito mais tempo. Além disso, etiquete cada placa com a estirpe e a data para acompanhar a sua genética.

Do agar para o grão e para a cultura líquida

Quando tiver uma cultura limpa em agar, pode passar à fase seguinte: transfira uma cunha de micélio para grão esterilizado, ou multiplique-a num frasco de cultura líquida pré-esterilizado. Ainda não está pronto para o agar? As nossas seringas de cultura líquida prontas a usar contêm genética isolada, para passar diretamente à inoculação.

Conclusão

Uma placa de Petri com agar é uma forma prática de conservar as suas estirpes favoritas. É também uma ferramenta valiosa para experimentar. A cada transferência aprende mais sobre as suas culturas. Em suma, trabalhar com agar é uma competência essencial para qualquer micólogo.

Ainda não tem câmara de fluxo? Saiba como construir e usar uma still air box para trabalhar de forma limpa com agar.