Cultures de champignons sur boîte de Petri agar

Vous êtes-vous déjà demandé comment on cultive et conserve des cultures vivantes de champignons sur une boîte de Petri agar ? Le travail sur gélose permet aux mycologues et aux amateurs de préserver, de nettoyer et de multiplier leurs souches préférées. Dans ce guide de la boîte de Petri agar, nous vous accompagnons des spores ou du tissu jusqu’à une culture saine et propre. Nous vous montrons aussi comment la garder en bonne santé pendant des mois.

Qu’est-ce qu’une boîte de Petri agar ?

L’agar est une substance gélatineuse extraite d’algues. Mélangé à des nutriments comme l’extrait de malt et la levure, il forme une surface ferme et nutritive. Le mycélium, la partie végétative du champignon, y pousse bien. Comme vous voyez chaque zone de croissance sur la boîte, vous repérez facilement les contaminations. Vous pouvez ainsi sélectionner le mycélium le plus vigoureux et le plus propre. Vous pouvez couler vos propres boîtes, mais il faut alors un autocuiseur et un poste de travail propre. Nos boîtes de Petri de gélose malt-levure prêtes à l’emploi sont coulées en conditions stériles, pour démarrer tout de suite.

Étape 1 : partir de spores ou de tissu

Le processus commence avec des spores ou un petit échantillon de tissu prélevé sur un champignon mûr. Vous les transférez ensuite avec précaution sur la surface stérile d’une boîte de Petri agar.

• Spores : elles germent mieux sur une boîte pauvre en nutriments. Nos boîtes de gélose pour spores utilisent une recette légère malt-levure conçue pour la germination.
• Tissu (clonage) : un petit morceau prélevé à l’intérieur d’un champignon sain vous donne une copie génétique exacte de ce champignon. Pour en savoir plus, lisez notre guide pour améliorer la génétique des champignons par clonage.

Étape 2 : germination et isolement primaire

Une fois posées sur la gélose, les spores germent et commencent à former du mycélium. Avec le temps, le mycélium s’étend sur la boîte en un fin réseau de filaments blancs ou colorés. Cette étape s’appelle l’isolement primaire. Vous sélectionnez alors les zones à la croissance la plus vigoureuse et la plus saine. Vous pouvez ainsi isoler des souches ou variétés uniques. Fermez chaque boîte avec du Parafilm après l’inoculation : il empêche les contaminants d’entrer tout en permettant les échanges gazeux minimaux dont la culture a besoin.

Étape 3 : repiquer pour garder une culture propre

Pour entretenir une culture vivante, transférez régulièrement un petit morceau de mycélium sur une boîte de gélose neuve. Ce procédé s’appelle le repiquage et garde la culture vigoureuse et durable. Prélevez toujours le mycélium sur le front de croissance le plus propre. Vous laissez ainsi la contamination derrière vous et conservez une souche saine et pure. Travaillez en air calme ou, idéalement, devant une hotte à flux laminaire ou une unité de filtration HEPA, et portez des gants en nitrile pour réduire le risque de contamination.

Étape 4 : conserver des cultures vivantes

Une bonne conservation est cruciale pour la longévité des cultures vivantes. La plupart des cultivateurs gardent leurs boîtes au réfrigérateur à environ 4–8 °C. La fraîcheur ralentit le mycélium. La culture dure donc beaucoup plus longtemps. Étiquetez aussi chaque boîte avec la souche et la date pour suivre votre génétique.

De la gélose aux grains et à la culture liquide

Une fois que vous avez une culture propre sur gélose, vous pouvez passer à l’étape suivante : transférez un morceau de mycélium sur des grains stérilisés, ou multipliez-le dans un flacon de culture liquide préstérilisé. Pas encore prêt pour la gélose ? Nos seringues de culture liquide prêtes à l’emploi contiennent une génétique isolée, pour passer directement à l’inoculation.

Conclusion

Une boîte de Petri agar est un moyen pratique de préserver vos souches préférées. C’est aussi un outil précieux pour expérimenter. À chaque transfert, vous en apprenez davantage sur vos cultures. Bref, le travail sur gélose est une compétence essentielle pour tout mycologue.

Pas encore de hotte à flux laminaire ? Découvrez comment fabriquer et utiliser une still air box pour un travail propre sur gélose.